Rozpoznanie choroby Whipplea za pomocą analizy molekularnej krwi obwodowej czesc 4

Ścieżka 2 pokazuje zamplifikowany przez produkt DNA z pełnej krwi z ludzkiej kontroli i pokazuje produkt .-globiny. Ścieżki 3 i 4 przedstawiają zamplifikowane DNA odpowiednio od pacjentów w Przypadku i Przypadku 2, po prezentacji. Zarówno produkty specyficzne dla .-globiny jak i Whipple a są widoczne. Ścieżki 5, 6, 7 i 8 pokazują próbki kontrolne amplifikowane DNA uzyskanym w Przypadek 2 po trzech miesiącach terapii i DNA odpowiednio z A. pyogenes, M. luteus i M. chelonei. Tylko produkty kontrolne zostały wzmocnione. PCR ze starterami specyficznymi dla choroby Whipple a generalnie odtwarzał produkt o przewidywanej wielkości (284 bp, około 20 procent genu 16S rRNA), gdy stosowaliśmy DNA wyekstrahowane z filmów krwi od pacjenta w Przypadku lub DNA pełnej krwi otrzymane z pacjenta w Przypadku 2 podczas prezentacji (ryc. 2). Te specyficzne startery nie były w stanie zamplifikować produktu z DNA pełnej krwi uzyskanym od pacjenta w Przypadku 2 po trzech miesiącach leczenia lub DNA z organizmów filogenetycznie spokrewnionych. Jednakże startery .-globiny wytworzyły produkt u pacjenta w przypadku 2 po traktowaniu, podobnie jak startery dla zakonserwowanych eubakteryjnie sekwencji 16S rRNA w filogenetycznie pokrewnych organizmach. Sekwencje nukleotydowe zamplifikowanych produktów od obu pacjentów były identyczne z domeną obejmującą nukleotydy od 984 do 1213 genu 16S rRNA z T. whippelii (numer dostępu w GenBank M87484) 8.
Dyskusja
Przedstawiamy tutaj przypadki dwóch pacjentów, którzy wcześniej przeszli splenektomię i którzy przedstawili przewlekłe objawy zgodne z rozpoznaniem choroby Whipple a. W obu badaniach błon z krwi obwodowej ujawniono bakterie Gram-dodatnie związane z erytrocytami. Częściowe sekwencjonowanie genu 16S rRNA z tych organizmów wykazało obecność T. whippelii, proponowanego organizmu sprawczego choroby Whipple a. Ten raport potwierdza fakt, że diagnozę choroby Whipple a można ustalić z krwi obwodowej za pomocą testu molekularnego, jak zaproponowali Relman i wsp. [8] Ponadto, nasz raport demonstruje hematotropową naturę pałeczki Whipple a.
Analiza sekwencji bakteryjnego genu 16S rRNA okazała się wiarygodna w definiowaniu członków tego samego rodzaju, nawet w przypadku bakterii, które nie mogą być hodowane5-8,16. Sekwencja genu 16S rRNA z Bacillus Whipple a została ostatnio określona i okazała się unikalna i praktycznie identyczna u wszystkich sześciu badanych pacjentów. Na podstawie tych doniesień wykorzystaliśmy ustalone startery swoiste dla choroby Whipple a do oceny infekcji T. whippelii. Analiza sekwencji produktów PCR amplifikowanych z DNA pełnej krwi od obu pacjentów wykazała, że sekwencja normalnie rozbieżnej domeny bakteryjnego 16S rRNA miała 100% homologii z T. whippelii.
W żadnym przypadku nie wykonywano konwencjonalnych testów diagnostycznych – biopsji zainfekowanych narządów. Uważamy jednak, że zespoły kliniczne pacjentów, ich reakcje na leczenie i obecność pałeczek Gram-dodatnich z typowym elektronowo-mikroskopowym odkryciem błony trójbamelarnej na zewnątrz ściany komórkowej potwierdzają rozpoznanie choroby Whipple a.
Chociaż Relman i współpracownicy dostarczyli mocnych dowodów, które sugerują, że ich organizm jest przyczyną choroby Whipple a, związek między T
[przypisy: zwapnienie aorty brzusznej leczenie, endometrioza wikipedia, badanie rf cena ]

Powiązane tematy z artykułem: badanie rf cena endometrioza wikipedia zwapnienie aorty brzusznej leczenie